Jan 3, 2007 22:06
18 yrs ago
1 viewer *
English term
dry-cut vs. wet-cut
English to Russian
Science
Biology (-tech,-chem,micro-)
electronic microscopy
Один из этапов изготовления микропрепарата мышечного волокна (в данном случае - для электронной микроскопии). Собственно изготовление среза, две взаимоисключающие техники. Сам этим не занимался, так что мыслей особых нет. Подскажите, уважаемые гистологи, чем одно отличается от другого.
Спасибо заранее!
Спасибо заранее!
Proposed translations
(Russian)
5 +2 | получение ультратонких срезов сухим/влажным способом |
Natalie
![]() |
3 +1 | техника приготовления срезов с увлажнением и без увлажнения лезвия |
Marina Aleyeva
![]() |
Proposed translations
+2
1 hr
Selected
получение ультратонких срезов сухим/влажным способом
Методы, собственно не взаимоисключающие, просто это два разных способа получения срезов.
Метод wet-cutting применяется как для образцов, залитых в различные смолы, так и для замороженных. В этом случае на ноже есть ванночка, заполняемая раствором с добавками, снижающими поверхностное натяжение (например, 10% ацетон), чтобы мениск был как можно более плоским. Срезы, сходящие с лезвия ножа плавают на поверхности раствора, откуда их вылавливают на сетки.
В случае dry-cutting такой ванночки на ноже нет, срезы (в этом случае замороженные) остаются на поверхности ножа, после чего их с большими усилиями нужно оттуда снимать ресничкой, расправлять, потому что они стремятся скрутиться в трубочку, и помещать на сетки. Нож должен быть в этом случае как можно лучше охлажден, иначе вообще ничего не получится. Иногда для улучшения охлаждения на нож подается струйка хладагента, но это не следует путать с wet-cutting.
Ножи ждя этих целей пригодны как стеклянные (на сумском замораживающем ультрамикротоме, с которым я когда-то мучилась, мы работали именно со стеклянными ножами), а лучшие алмазные ножи делает фирма Diatome. Как они выглядят - посмотрите на последней странице здесь:
http://jmicro.oxfordjournals.org/cgi/issue_pdf/frontmatter_p...
http://jmicro.oxfordjournals.org/cgi/issue_pdf/frontmatter_p...
--------------------------------------------------
Note added at 1 hr (2007-01-03 23:52:22 GMT)
--------------------------------------------------
Поправка к ответу Марины: форма держателя ни при чем, просто или на ноже есть ванночка, или ее нет, вот и все.
Метод wet-cutting применяется как для образцов, залитых в различные смолы, так и для замороженных. В этом случае на ноже есть ванночка, заполняемая раствором с добавками, снижающими поверхностное натяжение (например, 10% ацетон), чтобы мениск был как можно более плоским. Срезы, сходящие с лезвия ножа плавают на поверхности раствора, откуда их вылавливают на сетки.
В случае dry-cutting такой ванночки на ноже нет, срезы (в этом случае замороженные) остаются на поверхности ножа, после чего их с большими усилиями нужно оттуда снимать ресничкой, расправлять, потому что они стремятся скрутиться в трубочку, и помещать на сетки. Нож должен быть в этом случае как можно лучше охлажден, иначе вообще ничего не получится. Иногда для улучшения охлаждения на нож подается струйка хладагента, но это не следует путать с wet-cutting.
Ножи ждя этих целей пригодны как стеклянные (на сумском замораживающем ультрамикротоме, с которым я когда-то мучилась, мы работали именно со стеклянными ножами), а лучшие алмазные ножи делает фирма Diatome. Как они выглядят - посмотрите на последней странице здесь:
http://jmicro.oxfordjournals.org/cgi/issue_pdf/frontmatter_p...
http://jmicro.oxfordjournals.org/cgi/issue_pdf/frontmatter_p...
--------------------------------------------------
Note added at 1 hr (2007-01-03 23:52:22 GMT)
--------------------------------------------------
Поправка к ответу Марины: форма держателя ни при чем, просто или на ноже есть ванночка, или ее нет, вот и все.
Note from asker:
Замечательно! Сразу вспомнился секционный курс на патоанатомии, где все эти запарафиненные срезы упорно норовили скрутиться, доводя препаратора до белого каления :) |
4 KudoZ points awarded for this answer.
Comment: "Selected automatically based on peer agreement."
+1
1 hr
техника приготовления срезов с увлажнением и без увлажнения лезвия
Судя по описаниям, для микротомов-криостатов бывают ножи со специальным приспособлением (например, желобом), которое наполняют жидкостью для увлажнения лезвия во время резки. Такие ножи идут в прямоугольном держателе. Это wet cutting, а dry cutting, соответственно, без увлажнения и с треугольным держателем. Есть марка таких ножей Diatome. Поройтесь, может быть, удастся найти что-то еще. Описание wet cutting здесь:
Trough liquid: the water should be level with the cutting edge and give a good reflection. ( see all exceptions in Troubleshooting.) The boat should be filled until the cutting edge is moistened. Then the left and right hand sides of the boat are wetted with the tip of a toothpick without touching the knife edge or the cement mounting material.
http://www.emsdiasum.com/Diatome/diamond_knives/manual.htm
The 35° Cryo-Wet Low Angle Knife:
These low angle cryo knives possess the same properties as the dry ones with the exception of the diamond mount. In the wet version of these cryo knives the diamonds are supplied in a boat which allows you to section with a floating liquid (ie: DMSO).
The 45° Cryo-Wet Standard Knife:
For routine cryo sectioning with trough liquid.
http://www.proscitech.com.au/catalogue/u3.asp#wet
--------------------------------------------------
Note added at 1 hr (2007-01-03 23:41:01 GMT)
--------------------------------------------------
или со смачиванием/без смачивания...
Trough liquid: the water should be level with the cutting edge and give a good reflection. ( see all exceptions in Troubleshooting.) The boat should be filled until the cutting edge is moistened. Then the left and right hand sides of the boat are wetted with the tip of a toothpick without touching the knife edge or the cement mounting material.
http://www.emsdiasum.com/Diatome/diamond_knives/manual.htm
The 35° Cryo-Wet Low Angle Knife:
These low angle cryo knives possess the same properties as the dry ones with the exception of the diamond mount. In the wet version of these cryo knives the diamonds are supplied in a boat which allows you to section with a floating liquid (ie: DMSO).
The 45° Cryo-Wet Standard Knife:
For routine cryo sectioning with trough liquid.
http://www.proscitech.com.au/catalogue/u3.asp#wet
--------------------------------------------------
Note added at 1 hr (2007-01-03 23:41:01 GMT)
--------------------------------------------------
или со смачиванием/без смачивания...
Peer comment(s):
agree |
Natalie
: Ну-ну... надо было выждать ровно час :)//Собственно, с ответом я не совсем согласна,при wet-cut не только увлажняется нож, но и срезы плавают на поверхности//Факт, остается :)
11 mins
|
Ну, суть-то - смачивание лезвия - остается!
|
Something went wrong...